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          選擇液相色譜柱要考慮哪些因素?

          更新時間:2017-06-29瀏覽:1014次

          色譜柱是運用于色譜儀系統中起著分離作用的儀器,是色譜儀分析系統的核心部件,色譜柱柱效的高低影響著檢測速率的快慢以及檢測結果的性。因此,為了提高色譜柱的柱效,液相色譜儀分析檢測的靈敏性,了解液相色譜柱的選購技巧尤為重要。   

          選擇液相色譜柱時需要考慮的主要因素包括:鍵合相、粒徑、孔徑、碳載量,下面來一一介紹:
           
          1、鍵合相:確定了正反相后基本就簡單了,正相很簡單,我們重點討論下反相,C18主要分離非極性和弱極性物質,因為是鍵合硅膠,所以C18也分好幾種有常規的如C18-A,耐純水的OL Apple C18-AQ、耐酸堿的OL Apple C18-EX等,如果發現C18保留很弱,調整流動相也不行,這個時候可以考慮C8甚至C4等。
           
          2、粒徑:色譜法追求的是、高分辨、高速等。目前來說亞2um填料或者2UM核殼填料是很理想的模型,基本具備“三高”特征尤其是高速,線速度不在影響分離度,不過附帶的缺點就是高壓,要升級相應的硬件,成本高昂,需要謹慎考慮。5um填料普遍,目前來說可以勝任各種日常檢測,即使有特殊要求,3um色譜填料基本上也能全覆蓋,不過該模型下線速度和分離度是成反比的。
           
          3、孔徑:目前很多60~300A都有,甚至更高或者更低的。開孔的填料多了個類似分子篩功能,所以選擇孔徑一定要關注分子量,蛋白(分子量5000以上)一般都需要在160A以上,多肽(分子量上限在3000左右)在120A左右,一般快速柱孔徑都很小,可以縮短樣品路徑。所以上還有無孔硅膠柱子,也很適合蛋白分離,解決蛋白分子量大和太粘稠堵住孔徑問題。
           
          4、碳載量:快速柱碳載量很低,如A家等,省時間,省溶劑,但分析部分復雜樣品如中藥等有點力不從心,這個時候可以考慮英國OL Apple色譜柱,碳載量15~23%,碳載量數值就像河床的水草,越高代表越密集,保留樣品能力越強,越有可能分離開難分離物質。

           

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